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激光捕获显微切割技术用于1型糖尿病的研究
发布时间:2016-08-02   点击次数:950次

  从胰腺细胞中提取RNA具有一定的挑战性,在这里,美国俄亥俄州立大学的科学家Robert Szulawski等提出一种可重复的方法,该方法可

以从啮齿动物幼体胰腺细胞中获得充足的、高质量的RNA,用于体外表达研究。组织取自TLR3+/+TLR3-/-的雌性非肥胖型糖尿病老鼠,该

老鼠处于糖尿病前期阶段。组织经液氮冷冻后切片,将组织切片固定在高浓度的酒精溶液中,并用含酒精的甲酚紫溶液染色,再水化作用使

得固定切片最小化。激光显微切割系统Leica LMD6000 能够从外形上识别胰腺细胞,并从组织中捕获高浓度的胰腺RNA样品。用胰腺cDNA

进行探针法实时定量PCR检测CXC趋化因子配体10,该配体是一种炎症标记物可用于鉴定1型糖尿病。这一方法可作为显微切割技术用于啮

齿动物胰腺细胞的典型代表,采用此方法只需要少量的组织便可进行表达研究,且不需要进行RNA的预扩增。利用非肥胖型糖尿病老鼠作为

动物模型对于1型糖尿病的研究具有直接意义。

 

原文:

Robert SzulawskiMasato NakazawaKelly D. McCallCalvin B.L. Jamesand Frank L. SchwartzLaser capture 

microdissection tailored to type 1 diabetes mellitus researchBioTechniques60: 293-298 (August 2016)      

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